Museum ini berlokasi di kawasan Peneleh, Surabaya, tepatnya di rumah yang pernah dihuni HOS Tjokroaminoto pada awal abad ke-20. Dari bangunan sederhana bergaya kolonial ini, lahir gagasan-gagasan besar tentang pergerakan nasional. Para pemuda seperti Soekarno pernah tinggal dan belajar langsung dari Tjokroaminoto, menjadikan rumah ini pusat diskusi politik, sosial, dan kebangsaan di masanya. Kini, rumah tersebut dilestarikan sebagai museum untuk mengenang peran pentingnya dalam sejarah Indonesia.

Di dalam museum, pengunjung dapat melihat foto-foto lawas, dokumen perjuangan, replika perabot rumah, serta panel informasi yang menceritakan perjalanan hidup HOS Tjokroaminoto. Setiap ruangan disusun agar pengunjung dapat memahami suasana rumah pada masa pergerakan nasional, sekaligus mengenal tokoh-tokoh yang pernah singgah dan dibina di tempat ini. Narasi yang ditampilkan menekankan bagaimana pemikiran Tjokroaminoto memberi pengaruh besar terhadap arah perjuangan bangsa.

Selain sebagai tempat wisata sejarah, Museum HOS Tjokroaminoto juga menjadi sarana edukasi bagi pelajar dan masyarakat umum. Berbagai kegiatan seperti kunjungan sekolah, diskusi sejarah, hingga tur edukatif kerap dilakukan untuk menumbuhkan semangat nasionalisme. Dengan atmosfer yang sarat nilai perjuangan, museum ini menawarkan pengalaman belajar langsung dari sumber sejarah yang autentik di tengah kota Surabaya.